【摘 要】
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为获得狂犬病毒G基因并在大肠杆菌中进行表达,进而初步建立用于评价狂犬疫苗免疫效果的方法,根据狂犬病病毒RV（rabies virus）ERA株G基因序列设计引物,从病毒中提取出RNA,经逆转
【机 构】
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济源市动物卫生监督所,洛阳市动物疫病预防控制中心
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为获得狂犬病毒G基因并在大肠杆菌中进行表达,进而初步建立用于评价狂犬疫苗免疫效果的方法,根据狂犬病病毒RV（rabies virus）ERA株G基因序列设计引物,从病毒中提取出RNA,经逆转录并扩增得到RVG基因;将该基因片段定向克隆到原核表达载体pET28a（＋）中,构建重组质粒PET-RVG并转化到大肠杆菌BL21（DE3）gold中,经IPTG诱导表达并确定表达的最佳条件;Ni亲和层析柱纯化获得重组G蛋白,并以G蛋白为抗原建立检测狂犬病毒抗体的间接ELISA方法.检测结果表明,经灰度分析纯化后纯度可
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