【摘 要】
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目的:用大肠杆菌表达获得重组线虫抗凝血肽5(rNAP 5),为研究开发NAP5的功能与应用提供原料来源.方法:将扩增的NAP5基因经BamH Ⅰ和HindⅢ双酶切后与表达载体pET-32a连接.构建好
【机 构】
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广东医学院寄生虫学教研室,广东医学院药理学教研室
【基金项目】
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广东省自然科学基金项目资助(No.04011381)
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目的:用大肠杆菌表达获得重组线虫抗凝血肽5(rNAP 5),为研究开发NAP5的功能与应用提供原料来源.方法:将扩增的NAP5基因经BamH Ⅰ和HindⅢ双酶切后与表达载体pET-32a连接.构建好的重组表达质粒转化至大肠 杆菌BL21(DE3)后,分别经IPTG和乳糖诱导表达,并探讨诱导表达条件,分析表达产 物的可溶性情况.表达产物经镍亲和纯化后,用凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血 活酶时间(aPTT)检测体外抗凝活性.结果:成功构建了pET-32a/NAP5表达载体,IPT G和乳糖均能诱导目的
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