【摘 要】
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目的对结核杆菌Ag85A抗原基因进行克隆、表达与纯化,为研制新型结核杆菌血清学诊断试剂奠定基础.方法以结核杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,经PCR扩增Ag85A抗原基因成熟肽编码区
【机 构】
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川北医学院附属医院药剂科,川北医学院病理生理学教研室
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目的对结核杆菌Ag85A抗原基因进行克隆、表达与纯化,为研制新型结核杆菌血清学诊断试剂奠定基础.方法以结核杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,经PCR扩增Ag85A抗原基因成熟肽编码区,定向克隆入原核表达载体pGEX1-λT中日本血吸虫谷胱苷肽硫转移酶(GST)编码区下游构建重组质粒,经DNA测序鉴定后,转化大肠杆菌JM109株,IPTG诱导表达,采用GST蛋白纯化试剂盒进行重组融合蛋白纯化,SDS-PAGE和Westernblot鉴定重组表达产物.结果PCR扩增获得了约900 bp的目的基因片断,定向克
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