嗜冷杆菌EastSeaG5-1415脂肪酶基因的克隆和序列测定

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从东海深海底泥中筛选到一株产低温碱性脂肪酶的海洋细菌EastSeaG5-1415,经鉴定为嗜冷杆菌Psychrobacter glacincola.将其染色体DNA用Sau3AI部分酶切后,低熔点琼脂糖回收2~10kb 的DNA片段,用Klenow大片段酶半补齐,与用Sal I酶切半补齐的质粒pUC19连接后,转化E.coli.JM109构建基因文库.用平板测活法从基因文库初步筛选到两株产碱性脂肪酶的阳性克隆,采用ELISA反应进一步鉴定.序列测定分析表明,两个重组质粒中都包含长度为951bp的碱性脂肪酶
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