人肥胖基因大肠杆菌表达载体的构建及其诱导表达

来源 :华中农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：dande

【摘要】

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通过设计1对PCR引物（上游引物,5-′GCCATATGGTGCCGATCCAAAAAG-3′,下游引物,5-′GAGAATTCCCTTCAAGGCCTCAG-3′）,采用PCR方法扩增出人肥胖基因编码成熟肽的核苷酸序列,将扩增产

【作者】

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刘建忠敖敬田为宇周卫鲁礼林张晓龙

【机构】

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武汉科技大学化学工程与技术学院,武汉科技大学计算机学院

【出处】

：

华中农业大学学报

【发表日期】

：

2008年6期

【关键词】

：

人肥胖基因原核表达载体诱导表达 human obese gene prokaryotic expression vector induced expre

【基金项目】

：

国家“863”项目（2001AA213081）和东南大学生物电子学国家重点实验室开放课题资助

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通过设计1对PCR引物（上游引物,5-′GCCATATGGTGCCGATCCAAAAAG-3′,下游引物,5-′GAGAATTCCCTTCAAGGCCTCAG-3′）,采用PCR方法扩增出人肥胖基因编码成熟肽的核苷酸序列,将扩增产物从琼脂糖凝胶上回收后插入测序载体pMD-18-T后进行了核苷酸序列测定。将经EcoRⅠ和NdeⅠ双酶切后的扩增产物插入经EcoRⅠ和NdeⅠ双酶切后的大肠杆菌表达载体pET-28a（＋）,构建了可在大肠杆菌中高效表达人瘦蛋白的表达载体。将表达载体转化入大肠杆菌菌株BL21,经I

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