人心肌细胞中NLRP3融合蛋白表达的鉴定

来源 :广西医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：aa70533028

【摘要】

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目的：构建人NLRP3真核表达载体并证实NLRP3融合蛋白在人心肌细胞中表达。方法以人胎脑cDNA文库为模版，PCR扩增NLRP3全长编码基因，亚克隆至pCDNA3．1-myc-his A表达载体中。将构建

【作者】

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齐斌任威李春江张锐

【机构】

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中国人民解放军第202医院心血管内科

【出处】

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广西医学

【发表日期】

：

2014年1期

【关键词】

：

心肌细胞质粒构建 NLRP3 蛋白印迹流式细胞仪 Myocardial cell Plasmid construction NLRP3 Western b

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目的：构建人NLRP3真核表达载体并证实NLRP3融合蛋白在人心肌细胞中表达。方法以人胎脑cDNA文库为模版，PCR扩增NLRP3全长编码基因，亚克隆至pCDNA3．1-myc-his A表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到人心肌细胞中，提取细胞蛋白进行Western blot检测。利用流式细胞仪观察Myc-NLRP3在人心肌细胞内的作用。结果 NLRP3全长基因序列克隆到了真核表达载体 pCDNA3．1-myc-his A中，酶切鉴定片段大小为3111 bp。 Western blot检测到了融合蛋

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