【摘 要】
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MAPK很可能在白色念珠菌形态发生中起作用。根据所有MAPK保守区域VIB和IX的氨基酸序列合成了两个简并的引物 ,以SC5 314染色体DNA作为模板 ,在非严谨条件下 (37℃ )进行PCR以
【机 构】
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中国科学院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室!上海200031;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目!No .3 962 5 0 0 9;No.3 9970 0 16;中科院特别支持费!No .STZ 0 2 0 3&&
论文部分内容阅读
MAPK很可能在白色念珠菌形态发生中起作用。根据所有MAPK保守区域VIB和IX的氨基酸序列合成了两个简并的引物 ,以SC5 314染色体DNA作为模板 ,在非严谨条件下 (37℃ )进行PCR以筛选白色念珠菌中新的MAPK基因。一共测定了 10 0个PCR基因片段的序列 ,在 2 5个新基因片段中 ,筛选到两个新的MAPK基因片段 ,以这两个基因片段为探针从染色体基因库中克隆了对应的全长基因 ,序列分析表明它们是新的MAPK基因 ,分别命名为CSK1和CEK2。CSK1基因全长 1193bp ,其中有一个 92bp的内含子 ,编码一个 36 7个氨基酸的蛋白激酶 ,Csk1分子中有ATP结合信号 ,在第 7与第 8亚结构域之间的L12 区有TNY序列。它与酿酒酵母SMK1同源性最高 ,核苷酸同源性达 5 5 .3% ,氨基酸同源性达 5 0 %。SMK1是酿酒酵母孢子形成途径的MAPK ,为孢子壁的形成所必需。体外磷酸化激酶活力测定表明Csk1可磷酸化牛髓鞘脂蛋白MBP但不能磷酸化组蛋白H1。
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