【摘 要】
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目的:探讨在低氧联合脂多糖(LPS)作用下,星形胶质细胞中B淋巴细胞瘤-2/腺病毒E1B 19-kD相互作用蛋白3(BNIP3)的表达和炎症反应变化.方法:将体外培养的原代星形胶质细胞和神经元进行下列分组:常氧组、LPS组、低氧组和LPS+低氧组(每组设置3个复孔).LPS处理后,低氧组和LPS+低氧组放入低氧细胞孵箱,LPS组和常氧组放入正常的细胞孵箱.LPS浓度:100 ng/ml,氧气浓度为0.3％.处理时间为24 h.原代的星形胶质细胞进行上述的分组,时间点设为6 h、12 h和24 h.West
【机 构】
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中国药科大学药物科学研究院,南京210009;军事医学研究院军事认知与脑科学研究所,北京 100850;军事医学研究院军事认知与脑科学研究所,北京 100850;江苏省神经再生协同创新中心,南京210
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目的:探讨在低氧联合脂多糖(LPS)作用下,星形胶质细胞中B淋巴细胞瘤-2/腺病毒E1B 19-kD相互作用蛋白3(BNIP3)的表达和炎症反应变化.方法:将体外培养的原代星形胶质细胞和神经元进行下列分组:常氧组、LPS组、低氧组和LPS+低氧组(每组设置3个复孔).LPS处理后,低氧组和LPS+低氧组放入低氧细胞孵箱,LPS组和常氧组放入正常的细胞孵箱.LPS浓度:100 ng/ml,氧气浓度为0.3％.处理时间为24 h.原代的星形胶质细胞进行上述的分组,时间点设为6 h、12 h和24 h.Western blot检测BNIP3的表达变化,RT-PCR和ELISA分别检测星形胶质细胞的肿瘤坏死因子-ɑ(TNF-ɑ)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)mRNA水平变化和分泌情况.结果:与常氧组比较,低氧组炎症因子的表达没有变化,LPS组和LPS+低氧组的炎症因子TNF-ɑ、IL-1β和IL-6 mRNA水平升高(P<0.01);与LPS组比较,LPS+低氧组炎症因子IL-1β和IL-6 mRNA水平进一步升高(P<0.05,P<0.01).与常氧组比较,低氧组炎症因子的分泌水平没有变化,LPS组和LPS+低氧组的炎症因子TNF-ɑ和IL-6分泌水平升高(P<0.01),IL-1β的水平没有变化;与LPS组比较,LPS+低氧组炎症因子TNF-ɑ和IL-6分泌水平没有进一步升高.BNIP3在体外培养的神经元和星型胶质细胞中都有表达;在星形胶质细胞中,与常氧组比较,LPS组BNIP3的表达没有变化,低氧组和LPS+低氧组BNIP3的表达明显增加(P<0.01);在神经元中,与常氧组比较,LPS组BNIP3的表达没有变化,低氧组和LPS+低氧组BNIP3的表达增加(P<0.05,P<0.01);与神经元的低氧组比较,星形胶质细胞的低氧组BNIP3的表达增加更明显(P<0.01).在星形胶质细胞中LPS联合低氧刺激6、12、24 h后BNIP3蛋白的表达,与常氧组相同时间点比较,LPS组BNIP3的表达没有变化,低氧组和LPS+低氧组BNIP3的表达增加(P<0.05,P<0.01);与低氧组相同时间点比较,6 h和12 h的LPS+低氧组BNIP3的表达增加的更高(P<0.01).结论:低氧联合LPS刺激可以增强星形胶质细胞的炎症反应,LPS能增加低氧下星形胶质细胞中BNIP3的表达,提示BNIP3在星形胶质细胞的炎性反应中可能具有一定的调节作用.
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