【摘 要】
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目的：基于核转录因子E2相关因子2（nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2）/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（Kelch-like ech-associated protein 1,Keap1）信号通路研究黄芩甲苷对糖尿病肾病（diabetic nephropathy, DN）小鼠肾损伤的作用。方法：从60只C57BL/6小鼠中随机选择20只，分为对照组、
【基金项目】
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湖北省卫生计生委科研项目（WJ2017M187）；
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目的：基于核转录因子E2相关因子2（nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2）/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（Kelch-like ech-associated protein 1,Keap1）信号通路研究黄芩甲苷对糖尿病肾病（diabetic nephropathy, DN）小鼠肾损伤的作用。方法：从60只C57BL/6小鼠中随机选择20只，分为对照组、正常+黄芩甲苷组，每组10只，其余40只小鼠制备DN模型。将建模成功的小鼠随机分为DN组、DN+黄芩甲苷组、DN+LV-Keap1组、DN+LV-control组，每组10只，药物持续干预10周。采用高糖诱导SV40-Mes-13细胞后，进行pcDNA-Keap1、si-Keap1、miR-142 inhibitor、miR-Keap1mimic转染，转染后的细胞分组并进行药物干预。化学比色法检测SV40-Mes-13细胞培养上清液中SOD的活性；RT-qPCR检测肾组织中miR-142 mRNA的表达水平；Western Blot检测Nrf2、Keap1、HO-1蛋白表达水平；流式细胞仪检测SV40-Mes-13细胞凋亡。结果：与对照组比较，DN组miR-142 mRNA表达水平明显升高，Keap1、Nrf2蛋白表达水平明显降低；与DN组比较，DN+黄芩甲苷组miR-142 mRNA表达水平明显降低，Keap1、Nrf2蛋白表达水平明显升高；与DN+LV-control组比较，DN+LV-Keap1组Keap1、Nrf2、HO-1蛋白表达水平明显升高；与葡萄糖+NC组比较，葡萄糖+miR-142 inhibitor组Keap1、Nrf2蛋白表达水平及SOD水平明显升高，细胞凋亡率明显降低；与葡萄糖+miR-142 inhibitor组比较，葡萄糖+miR-142 inhibitor+si-Keap1组Keap1、Nrf2蛋白表达水平及SOD水平明显降低，细胞凋亡率明显升高；与葡萄糖+黄芩甲苷+pre-NC组比较，葡萄糖+黄芩甲苷+miR-142 mimic组Keap1、Nrf2蛋白表达水平及SOD水平明显降低，细胞凋亡率明显升高；与葡萄糖+黄芩甲苷+miR-142 mimic+pcDNA组比较，葡萄糖+黄芩甲苷+miR-142 mimic+pcDNA-Keap1组Keap1、Nrf2蛋白表达水平及SOD水平明显升高，细胞凋亡率明显降低，差异均具有统计学意义（P＜0.05）。结论：黄芩甲苷可逆转miR-142对Nrf2/Keap1信号通路的抑制作用进而改善糖尿病肾病肾损伤。
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