【摘 要】
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克隆并原核表达小反刍兽疫病毒弱毒疫苗株血凝素蛋白(H)全长基因,并通过生物信息学的方法预测其B抗原表位。根据NCBI中PPRV基因组序列中H基因序列(GenBankX74443)设计一对引
【机 构】
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西北民族大学甘肃省动物细胞工程技术研究中心,西北民族大学生物医学研究中心,西北民族大学生命科学与工程学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31860696),动物医学生物工程创新团队发展计划(IRT_17R88),甘肃省科技计划资助(17YF1WA166)
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克隆并原核表达小反刍兽疫病毒弱毒疫苗株血凝素蛋白(H)全长基因,并通过生物信息学的方法预测其B抗原表位。根据NCBI中PPRV基因组序列中H基因序列(GenBankX74443)设计一对引物,采用RT-PCR方法扩增其全长;将扩增产物克隆至原核表达载体pET-32a后,转化至大肠杆菌E.coliRosetta,经IPTG37℃诱导表达目的蛋白;表达的目的蛋白经带His标签的镍离子蛋白纯化柱纯化后,进行WesternBlot鉴定。利用DNAStar软件采用生物信息学的方法预测其H蛋白潜在的抗原表位。结果显示
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