信号蛋白质14—3—3ζ的高效融合表达和鉴定

来源 :中国神经免疫学和神经病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhjkkcd
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目的:利用分子克隆技术在原核细胞中研究14-3-3ζ蛋白的表达。方法:14-3-3ζcDNA经测序后,亚克隆至pBK-CMV表达载体,转化大肠杆菌BL21菌株,筛选阳性克隆,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达。结果:经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白印迹(Western blot)分析,表达的融合蛋白相对分子质量为32 000左右,能与14-3-3ζ蛋白特异性多克隆抗体发生免疫结合反应。结论:人14-3-3ζ蛋白在原核细胞中有大量表达,且具有良好的免疫反应性。
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