Sp1调控DOT1L表达并介导髓核细胞基质代谢的机制研究

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目的探讨髓核细胞中Sp1调控DOT1L表达并影响髓核细胞机制代谢的具体机制。方法分离培养人椎间盘髓核细胞,通过PCR、免疫蛋白印迹法对比腰椎间盘突出症患者与脊柱侧弯患者髓核组织的DOT1L表达差异;通过慢病毒转染敲除髓核细胞中DOT1L表达,利用PCR、免疫蛋白印迹法检测基质代谢相关分子表达和Wnt/β-catenin通路激活水平;检测炎性因子刺激前后髓核细胞相关转录因子表达变化,明确髓核细胞退变相关的关键转录因子;慢病毒敲除、过表达Sp1后检测DOT1L的表达变化情况,明确Sp1与DOT1L的调控关系。
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