【摘 要】
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目的建立分离、培养人循环纤维细胞的方法,并探讨其细胞生物学特征。方法取成人外周血白细胞,经淋巴细胞分离液分离,接种于含20%胎牛血清的DMEM培养液中进行培养。对贴壁生长
【机 构】
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北京中医药大学组织学与胚胎学教研室; 北京中医药大学组织学与胚胎学教研室 北京100029; 北京100029;
【基金项目】
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教育部“长江学者和创新团队发展计划”资助(IRT-0413);国家自然科学基金资助项目(30672757,30540420032);高等学校学科创新引智计划资助(B07007)
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目的建立分离、培养人循环纤维细胞的方法,并探讨其细胞生物学特征。方法取成人外周血白细胞,经淋巴细胞分离液分离,接种于含20%胎牛血清的DMEM培养液中进行培养。对贴壁生长的成纤维样细胞进行免疫组织化学鉴定,流式细胞仪分析和电镜观察,并通过测定培养液中羟脯氨酸含量,研究其胶原合成能力。结果细胞培养9d后CD34、CD45、Ⅰ型胶原分子阳性,其中Ⅰ型胶原分子阳性细胞含量为83.5%;电镜下观察具有典型的成纤维细胞特征;培养液中羟脯氨酸含量为11.17mg/L,明显高于空白对照组8.07mg/L(P<0.01),表明培养细胞具有胶原合成能力。结论成人外周血中存在成纤维细胞的前体细胞,经体外分离、培养可分化为循环纤维细胞。
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