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目的探讨一种新型Wnt替代蛋白(Wnt-S)对人脑血管内皮细胞中Wnt/β-catenin信号通路的作用,可能提供一种保护血脑屏障的新途径。方法用分子克隆技术构建Wnt-S in pcDNA3. 1(+)质粒,在HEK293F细胞中瞬时转染该质粒,表达纯化Wnt-S蛋白;Western blot检测含5x His-tag的Wnt-S蛋白;免疫荧光染色检测人源脑血管内皮细胞(hCMEC/D3)标记物CD31、VE-cadherin、GLUT1和MFSD2A;实时荧光定量PCR检测HEK293和hCMEC/D