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为了解新疆阿拉尔市某牛场无乳链球菌的感染情况以及耐药性，通过细菌分离培养、生化鉴定、CAMP试验和PCR技术对乳样进行无乳链球菌检测，并采用K-B纸片法对分离菌进行药敏试验。结果显示，62份乳样中分离出12株无乳链球菌，检出率为19.35%。分离菌的形态学特征、生化特性与无乳链球菌相符；12株分离菌株均检测到特异性基因cfb,16S rRNA序列与NCBI已报道的无乳链球菌相应序列同源性达99%以上。药敏试验结果表明，分离的无乳链球菌菌株对抗生素敏感性有差异，对万古霉素、阿莫西林-克拉维酸、头孢哌酮和红霉素敏感，对卡那霉素、链霉素、环丙沙星和氨苄西林中度敏感，对青霉素和四环素耐药。研究结果可为无乳链球菌性奶牛乳房炎的防治提供参考。