【摘 要】
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目的 探讨新型非病毒载体羟基磷灰石纳米粒子(nHAP)在肿瘤基因治疗中的作用及可能机制.方法 nHAP经氯化镁修饰后,经琼脂糖凝胶电泳判断nHAP-Mg2+与DNA的结合和保护作用.以增强型绿色荧光蛋白真核表达载体PEGFP-N1为报告基因,以脂质体作为基因载体转染到人类结肠癌SW480/M5细胞,流式细胞术测定转染效率和平均荧光值.四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法评价nHAP-Mg2+对细胞生长的
【机 构】
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030013太原,山西省肿瘤医院医务科,山西医科大学第二医院普外科,山西医科大学第二医院普外科,山西医科大学第二医院普外科
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目的 探讨新型非病毒载体羟基磷灰石纳米粒子(nHAP)在肿瘤基因治疗中的作用及可能机制.方法 nHAP经氯化镁修饰后,经琼脂糖凝胶电泳判断nHAP-Mg2+与DNA的结合和保护作用.以增强型绿色荧光蛋白真核表达载体PEGFP-N1为报告基因,以脂质体作为基因载体转染到人类结肠癌SW480/M5细胞,流式细胞术测定转染效率和平均荧光值.四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法评价nHAP-Mg2+对细胞生长的影响.结果 在质量比合适时,nHAP-Mg2+与DNA能够完全结合并对DNA起到保护作用.单独应用nHAP-Mg2+时无基因转移功能,联合脂质体共同作为基因转染的载体可成功将PEGFP-N1基因导入SW480/M5细胞,其转染效率和平均荧光强度高于单用脂质体组(P＜0.05).单纯应用nHAP-Mg2+和联合脂质体时,随着nHAP-Mg2+量的增加(0 ～ 50 μg/ml)对SW480/M5细胞的生长抑制作用增强(P＜0.05).结论 nHAP-Mg2+具有结合和保护质粒DNA的作用.作为脂质体的辅助载体,不但可以提高基因转染效率和稳定表达,还可增强基因治疗的抗肿瘤效果。
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