【摘 要】
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采用绿色荧光蛋白(GFP)标记技术研究钙离子钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)在HeLa细胞中的分布.为了研究细胞内钙离子钙调素信号的下游作用物,我们首先构建了CaMKⅡ与GFP的融
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采用绿色荧光蛋白(GFP)标记技术研究钙离子钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)在HeLa细胞中的分布.为了研究细胞内钙离子钙调素信号的下游作用物,我们首先构建了CaMKⅡ与GFP的融合基因,磷酸钙沉淀法将pCaMKⅡ-GFP重组载体导入HeLa细胞.通过荧光显微镜观察,发现在细胞间期,CaMKⅡ-GFP融合蛋白主要分布于细胞核中,细胞质中亦有少量分布,这一分布不同于绿色荧光蛋白在间期细胞内的均匀分布.同时讨论了与间接免疫荧光染色方法相比,GFP技术在功能蛋白定位研究上的应用优势.
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