【摘 要】
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目的 为鉴定慢病毒介导的转基因小鼠中外源基因的整合位点信息,应用接头PCR克隆整合位点旁侧序列.方法 小鼠基因组总DNA酶解后与设计的接头片段连接,根据慢病毒的LTR序列设计
【机 构】
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上海医学遗传研究所,卫生部医学胚胎分子生物学重点实验室暨上海市胚胎与生殖重点实验室,上海交通大学医学院医学科学院
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目的 为鉴定慢病毒介导的转基因小鼠中外源基因的整合位点信息,应用接头PCR克隆整合位点旁侧序列.方法 小鼠基因组总DNA酶解后与设计的接头片段连接,根据慢病毒的LTR序列设计巢式PCR引物,克隆转基因小鼠整合位点旁侧序列.结果 成功克隆到转基因小鼠整合位点的旁侧序列,经过测序定位于小鼠染色体上.结论 作为反向PCR的改进,本方法可用于转基因小鼠整合位点旁侧序列的克隆, 为分析整合位点与外源基因表达之间的关系等提供了科学依据.
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