【摘 要】
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目的 研究钠氢交换蛋白1(NH1)特异性抑制剂Cariporide对人胆囊癌细胞株GBC-SD体外转移能力的影响,初步探讨其作用机制.方法 采用双羧乙基碳氧荧光素四乙酰氧甲酯(BCECF-AM)荧光染料和酚红检测细胞内外氢离子浓度(pH)值.采用细胞-基质黏附实验、细胞划痕实验和细胞迁移侵袭(Transwell)实验分别检测Cariporide对GBC-SD细胞的黏附、迁移和侵袭能力的影响;实时P
【机 构】
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200092上海交通大学医学院胆道疾病研究所,附属新华医院普外科实验室,200092上海交通大学医学院胆道疾病研究所,附属新华医院普外科实验室,200092上海交通大学医学院胆道疾病研究所,附属新华医
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目的 研究钠氢交换蛋白1(NH1)特异性抑制剂Cariporide对人胆囊癌细胞株GBC-SD体外转移能力的影响,初步探讨其作用机制.方法 采用双羧乙基碳氧荧光素四乙酰氧甲酯(BCECF-AM)荧光染料和酚红检测细胞内外氢离子浓度(pH)值.采用细胞-基质黏附实验、细胞划痕实验和细胞迁移侵袭(Transwell)实验分别检测Cariporide对GBC-SD细胞的黏附、迁移和侵袭能力的影响;实时PCR、蛋白印迹法分别检测Cariporide对GBC-SD细胞基质金属蛋白酶(MMPs) mRNA及蛋白表达的影响.结果 Cariporide处理后GBC-SD细胞的细胞内pH和NHE1活性明显下降,胞外pH明显上升.细胞-基质黏附实验结果显示,Cariporide处理后的GBC-SD细胞体外黏附率降低至对照组的80%和61%,差异有统计学意义(P<0.05).细胞划痕实验和Transwell侵袭实验结果显示细胞损伤愈合的速度和穿过滤膜的细胞数量均少于对照组.实时PCR及蛋白印迹结果表明Cariporide可显著降低MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白水平的表达量(P均<0.05).结论 Cariporide可有效抑制人胆囊癌细胞株GBC-SD的体外转移能力,其作用机制可能与细胞内外pH值改变降低MMPs的表达有关。
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