【摘 要】
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目的 建立可在体外培养的人滋养层干细胞系（hTSCs）,为研究胎盘的发育机制提供新的模型。方法 取临沂市妇幼保健院生殖医学科患者捐赠的发育正常的5～6 d囊胚，利用延时培养技术分离获取hTSCs,进行细胞核型分析，利用免疫荧光技术和实时荧光定量PCR（RT-qPCR）技术检测hTSCs标记物的表达，并对hTSCs的侵袭能力、分化能力以及内分泌功能进行检测。结果 本实验成功建立4株hTSCs,其均具
【基金项目】
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山东省妇幼保健协会科技创新科研专项基金（2021年度）； 临沂市妇幼保健院科研基金项目（Y2021MS06）；
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目的 建立可在体外培养的人滋养层干细胞系（hTSCs）,为研究胎盘的发育机制提供新的模型。方法 取临沂市妇幼保健院生殖医学科患者捐赠的发育正常的5～6 d囊胚，利用延时培养技术分离获取hTSCs,进行细胞核型分析，利用免疫荧光技术和实时荧光定量PCR（RT-qPCR）技术检测hTSCs标记物的表达，并对hTSCs的侵袭能力、分化能力以及内分泌功能进行检测。结果 本实验成功建立4株hTSCs,其均具有正常细胞核型。免疫荧光技术检测显示，第8代hTSCs中转录因子活化蛋白2C（TFAP2C）、细胞角蛋白7（CK7）、转录因子GATA结合蛋白3（GATA-3）稳定表达；RT-qPCR检测结果显示，第8、16代hTSCs中CK7、GATA3、TFAP2C、TEAD4基因的相对表达量无显著性差异（P＞0.05）;分化组第2、4、6天穿过trasnswell微孔的细胞数量均多于未分化组（F=53.31～234.55,P＜0.05）;第4、6天分化组穿过trasnswell微孔的细胞表达GCM1的比例均高于未分化组（F=50.25,131.13,P＜0.05）;分化组中CK7、SDC-1、β-hCG和ITGA5基因的相对表达量均显著高于未分化组（t=-6.78～-2.51,P＜0.05）;分化组第2、4、6天培养基中雌二醇、孕酮浓度均高于未分化组（F=25.06～225.62,P＜0.05）。结论 本研究成功分离获取的hTSCs具有正常核型，均表达hTSCs特异标记物，其侵袭能力、分化能力及分泌功能等与人类早期胎盘滋养层细胞相似。这将为进一步研究人类滋养层细胞的发育和功能提供有力的工具。
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