【摘 要】
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旨在建立一种简便、高效的猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）的检测方法。本研究针对TGEV N基因设计了特异性的引物和探针，并构建重组质粒标准品TGEV-N，经过筛选及优化后建立TGEV荧光RT-RAA检测方法。结果显示，该方法在42℃恒温条件下进行，20 min即可完成检测，与猪流行性腹泻病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪德尔塔冠状病毒、猪肠道α冠状病毒等猪源病毒均无交叉反应；将TGEV-N稀释后，以1
【机 构】
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温州大学病毒学研究所温州市病毒学与免疫学重点实验室
【基金项目】
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温州市基础性科研项目（N20190005，N20180010）；
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旨在建立一种简便、高效的猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）的检测方法。本研究针对TGEV N基因设计了特异性的引物和探针，并构建重组质粒标准品TGEV-N，经过筛选及优化后建立TGEV荧光RT-RAA检测方法。结果显示，该方法在42℃恒温条件下进行，20 min即可完成检测，与猪流行性腹泻病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪德尔塔冠状病毒、猪肠道α冠状病毒等猪源病毒均无交叉反应；将TGEV-N稀释后，以100～106拷贝·μL-1作为模板，进行敏感性试验，结果显示该方法最低检出限可以达到6.62×101拷贝·μL-1；采用该方法对50份猪源样品进行检测，阳性率为6%（3/50），检测结果与RT-PCR一致。本试验建立的TGEV荧光RT-RAA检测方法简便、高效、特异、灵敏，为TGEV的临床筛查提供可行技术。
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