【摘 要】
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目的 探讨橙皮素对IL-1β诱导的软骨细胞损伤的影响及分子机制.方法 关节软骨细胞分为对照(control)组、IL-1β组、IL-1β+橙皮素低、中、高剂量组、IL-1β +si-circ_0039411组、IL-1β+si-NC组、IL-1β +HES+pcDNA-circ_0039411组、IL-1β+HES+pcDNA组.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-6、TNF-α、IFN-γ水平;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测蛋白表达;实时荧光定量PCR(RT-q
【机 构】
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277599,滕州市中心人民医院药学部
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目的 探讨橙皮素对IL-1β诱导的软骨细胞损伤的影响及分子机制.方法 关节软骨细胞分为对照(control)组、IL-1β组、IL-1β+橙皮素低、中、高剂量组、IL-1β +si-circ_0039411组、IL-1β+si-NC组、IL-1β +HES+pcDNA-circ_0039411组、IL-1β+HES+pcDNA组.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-6、TNF-α、IFN-γ水平;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测蛋白表达;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测circ_0039411和miR-296-5p的表达水平;双荧光素酶报告实验检测circ_0039411和miR-296-5p的靶向关系.结果 橙皮素低、中、高浓度组软骨细胞中IL-6、TNF-α、IFN-γ水平降低,cleaved-caspase3和cleaved-caspase9表达水平降低,软骨细胞凋亡率降低,circ_0039411表达水平降低,miR-296-5p表达水平升高,且呈浓度依赖性(P＜0.05).circ_0039411靶向调控miR-296-5p;抑制circ_0039411表达后,IL-6、TNF-α、IFN-γ水平降低,cleaved-caspase3和cleaved-caspase9表达水平降低,软骨细胞凋亡率降低(P＜0.05).circ_0039411过表达逆转了橙皮素对IL-1β诱导的软骨细胞损伤的作用.结论 橙皮素可能通过调控circ_0039411/miR-296-5p抑制IL-1β诱导的软骨细胞损伤.
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