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提出了高效液相色谱法测定食品中纳他霉素的方法，样品经甲醇-水（3＋1）溶液提取净化后，用高效液相色谱配紫外检测器在305nm波长处测定。纳他霉素的检测采用保留时间定性，外标法定量。方法的回收率在95．7％～102．0％之间，相对标准偏差均小于3％。方法的检出限（3S／N）为0．50μg·g^-1（固体样品），0．25mg·L^-1（液体样品）。