【摘 要】
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目的 探讨下调miR-361 3-5p通过靶向含FERM结构域蛋白6（FRMD6）调控肾癌细胞增殖和细胞周期的分子机制。方法 以Onco Lnc预后分析数据库分析miR-361 3-5p表达水平与肾癌患者预后的关系。用q PCR检测肾癌细胞株（A498、Caki-1、OS-RC-2、ACHN）和正常肾小管上皮细胞HK-2中miR-361 3-5p的表达水平。分别将miR-361 3-5p抑制物和阴
【机 构】
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恩施土家族苗族自治州中心医院泌尿外科
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目的 探讨下调miR-361 3-5p通过靶向含FERM结构域蛋白6（FRMD6）调控肾癌细胞增殖和细胞周期的分子机制。方法 以Onco Lnc预后分析数据库分析miR-361 3-5p表达水平与肾癌患者预后的关系。用q PCR检测肾癌细胞株（A498、Caki-1、OS-RC-2、ACHN）和正常肾小管上皮细胞HK-2中miR-361 3-5p的表达水平。分别将miR-361 3-5p抑制物和阴性对照质粒（si-miRCon）转染至Caki-1细胞,分为si-miR-361 3-5p组和si-miR-Con组。用CCK-8法和PI染色流式细胞术分别检测miR-361 3-5p抑制物对Caki-1细胞增殖和细胞周期的影响。q PCR和Western blotting检测Caki-1细胞中FRMD6 m RNA和蛋白的表达。Western blotting检测AKT/MAPK信号通路蛋白的表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-361 3-5p和FRMD6的靶向关系。结果与miR-361 3-5p表达较高的肾癌患者相比,miR-361 3-5p低表达肾癌患者的生存率较高（P＜0.01）。与HK-2细胞相比,miR-361 3-5p在肾癌细胞株中高表达（均P＜0.05）,Caki-1细胞中miR-361 3-5p表达最高（P＜0.01）。与si-miR-Co n组相比,si-miR-361 3-5p组Caki-1细胞增殖能力显著被抑制（P＜0.05）,细胞周期进展被明显抑制（P＜0.01）,FRMD6基因表达明显增加（P＜0.01）,AKT/MAPK信号通路蛋白p-AKT1、p-MAPK3、CCND1表达明显降低。双荧光素酶报告基因实验证实FRMD6是miR-361 3-5p的靶基因。结论 下调miR-361 3-5p表达能够明显促进FRMD6基因表达,进而抑制肾癌细胞增殖和细胞周期进展。
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