低氧及一氧化氮对SW480细胞缺氧诱导因子-1α、VEGF及iNOS表达的初步研究

来源 :中国病理生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:duozhiyu
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目的:观察一氧化氮(NO)对低氧培养的人结肠腺癌细胞株SW4 80中缺氧诱导因子- 1α(HIF - 1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法:运用免疫细胞化学检测HIF - 1α、VEGF、iNOS蛋白表达,Westernblot检测HIF - 1α蛋白表达。原位杂交法检测HIF - 1αmRNA表达。结果:免疫细胞化学染色图像分析结果显示:低氧组细胞HIF - 1α、VEGF和iNOS蛋白表达水平显著高于常氧组(P <0 . 0 1,P <0 . 0 1,P <0 . 0 5 )和低氧+genistein(三羟基异黄酮)组(P <0 . 0 1,P <0 . 0 5 ,P <0 . 0 5 )。低氧条件下,SNP(硝普钠)显著抑制HIF -1α、VEGF蛋白的表达,但对iNOS表达无明显影响;NOC5 (NO发生剂)诱导HIF - 1α、VEGF、iNOS蛋白的表达;NO抑制剂L -NAME(N -硝基精氨酸甲酯)则抑制3者的表达。Westernblot结果显示:低氧培养条件下,HIF - 1α呈强表达,给予genistein能显著抑制其表达;而给予SNP和L -NAME后,蛋白表达量减少,给予NOC5 ,则蛋白表达增强。原位杂交结果显示:常氧组、低氧组及低氧+genistein组、低氧+SNP组、低氧+NOC5组、低氧+L -NAME组HIF - 1αmR NA表达A值组间均无显著差异。结论:低氧诱导SW4 80细胞HIF - 1α蛋白表达量增高,从而上调VEGF和iNOS表达。低氧条件下,NO供体SNP抑制SW4 8
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