【摘 要】
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目的:研究阿尔茨海默病细胞模型中蛇床子素抑制淀粉样前体蛋白(APP)的作用及机制.方法:脂质体2000转染建立APP高表达的SH-SY5Y细胞模型.利用MTT和乳酸脱氢酶(LDH)法检测蛇床
【机 构】
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辽宁中医药大学药学院,辽宁 大连,116600;
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目的:研究阿尔茨海默病细胞模型中蛇床子素抑制淀粉样前体蛋白(APP)的作用及机制.方法:脂质体2000转染建立APP高表达的SH-SY5Y细胞模型.利用MTT和乳酸脱氢酶(LDH)法检测蛇床子素对APP高表达细胞的存活率和损伤程度的影响.利用基因芯片技术筛选给予蛇床子素治疗后差异表达的微RNA(miRNA),然后通过生物信息学分析预测与差异表达miRNA靶向结合的基因.细胞内转入差异表达miRNA的抑制剂,然后采用免疫荧光细胞化学法观察细胞中APP、β淀粉样蛋白(Aβ)表达情况,RT-PCR法检测细胞中APP mRNA表达.结果:实验成功构建了APP高表达的阿尔茨海默病细胞模型.MTT和LDH法检测结果显示,蛇床子素对于APP高表达的细胞具有一定的保护作用,可以减轻细胞的损伤.miRNA-101a-3p是蛇床子素调控较明显的miRNA,其与APP的3非翻译区靶向结合.与模型对照组比较,miR-101a-3p抑制剂组APP和Aβ蛋白荧光强度增加,APP mRNA表达量增加(均P<0.01);加入蛇床子素后细胞中APP和Aβ蛋白荧光强度降低,APP mRNA表达量减少(均P<0.01).结论:在阿尔茨海默病细胞模型中,蛇床子素通过上调miR-101a-3p抑制APP表达.
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