【摘 要】
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目的:探讨含目的基因趋化因子生长调节基因1(CXCL-1)慢病毒表达系统的构建及CXCL-1对7702正常肝细胞生长、增殖、迁移生物学功能的影响。方法:构建含目的基因CXCL-1的慢病毒
【机 构】
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广西医科大学附属肿瘤医院肝胆外科,广西医科大学附属肿瘤医院实验研究部
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目的:探讨含目的基因趋化因子生长调节基因1(CXCL-1)慢病毒表达系统的构建及CXCL-1对7702正常肝细胞生长、增殖、迁移生物学功能的影响。方法:构建含目的基因CXCL-1的慢病毒表达系统,建立携带GFP荧光标记并过度表达CXCL-1的7702正常肝细胞系,Western blot方法检测CXCL-1在转染细胞中的表达,细胞单克隆形成实验,MTT实验,Transwell实验检测7702细胞表达CXCL-1后生长、增殖和迁移能力的变化情况。结果:1成功构建目的基因CXCL-1慢病毒表达系统,病毒滴度检测结果为2.00E+8TU/mL;2转染48h后经流式细胞仪检测,转染率达94.5%;3CXCL-1/7702组克隆形成率显著高于其余两对照组(P<0.05);4MTT比色法结果显示:CXCL-1/7702组分别与空载GFP/7702组及空白对照7702组相比较,生长速度明显较快(P<0.05);5Transwell实验显示:CXCL-1/7702组、GFP/7702组、7702组肝细胞系均无迁移能力。结论:成功构建含目的基因CXCL-1的慢病毒表达系统,CXCL-1对正常肝细胞具有明显的促细胞生长与增殖功能,但无促进正常肝细胞迁移的功能。
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