非小细胞肺癌转移瘤基因型变化及耐药性机制研究

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目的

探讨非小细胞肺癌(NSCLC)转移瘤与原位肿瘤基因突变的差异以及耐药性产生的机制。

方法

实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测正常肺组织、非小细胞肺癌原位肿瘤组织与转移灶肿瘤组织中高频突变基因的表达差异;Real-time PCR检测正常肺组织、原位肿瘤细胞和转移灶肿瘤细胞体外传代P5、P10后高频突变基因表达变化,Transwell迁移实验、划痕实验检测各代细胞的迁移能力;用化疗药物处理正常肺组织、原位肿瘤细胞和转移灶肿瘤细胞,扩增3代后检测其高频突变基因表达差异,Transwell迁移实验、划痕实验检测各代细胞的迁移能力。

结果

Real-time PCR结果显示原位肿瘤组织RB1表达降低(0.72±0.05,P=0.013),转移灶组织RB1(0.75±0.02,P=0.004)与p53(0.23±0.07,P=0.021)表达降低,差异有统计学意义,证明原位肿瘤组织与转移灶组织基因突变有差异;传代后,原位肿瘤细胞与转移灶肿瘤细胞基因突变无变化,Transwell迁移实验和划痕实验结果差异无统计学意义;化疗药处理后,原位肿瘤细胞KRAS表达增加(3.43±0.31,P=0.002),转移灶组织第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)表达降低(0.43±0.25,P=0.015);迁移能力增强,差异有统计学意义(P=0.048、0.011)。

结论

NSCLC转移灶肿瘤基因突变与原位肿瘤不同,其是由转移过程造成;化疗可驱动肿瘤细胞产生新基因突变,从而使其具有耐药性。

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