MTERF1基因真核表达载体的构建及其在C-33A细胞中的表达研究

来源 :井冈山大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liyuwei9999

【摘要】

：

采用PCR技术从pGEM-MTERF1重组克隆载体中扩增出人MTERF1基因cDNA的开放阅读框序列,经KpnⅠ和XhoⅠ双酶切后,以pcDNA3.1（＋）为真核表达载体,构建重组质粒pcDNA3.1（＋）-MTERF1;通过PCR

【作者】

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梅雯张成桂自加吉孙美涛杨泽芳张晓娟熊伟

【机构】

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大理大学基础医学院,云南省昆虫生物医药研发重点实验室,大理市第一人民医院呼吸内科

【出处】

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井冈山大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2017年5期

【关键词】

：

线粒体转录终止因子1 克隆真核表达载体人子宫颈癌C-33A细胞株 mitochondrial transcription termination facto

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目（81560458,31601155）,云南省中青年学术与技术带头人后备人才项目（第十九批）,云南省教育厅科学研究基金重点项目（2014Z126,2016ZDX101,2016ZDX105）,大理大学大学生创新创业训练计划项目（CXCY-X-2016-18）,大理大学大学生科研基金项目（201609）

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采用PCR技术从pGEM-MTERF1重组克隆载体中扩增出人MTERF1基因cDNA的开放阅读框序列,经KpnⅠ和XhoⅠ双酶切后,以pcDNA3.1（＋）为真核表达载体,构建重组质粒pcDNA3.1（＋）-MTERF1;通过PCR、双酶切和DNA测序方法对重组子进行鉴定;将重组真核表达质粒pcDNA3.1（＋）-MTERF1转染C-33A细胞,利用免疫印迹法检测MTERF1蛋白的表达。结果显示,重组质粒pcDNA3.1（＋）-MTERF1经双酶切鉴定和菌落PCR鉴定均获得大小为1 200 bp的目的条带

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