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动物生物制品生产过程中细胞(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。细胞支原体污染可显著影响生产用细胞的培养及生物功能的发挥,最终影响生物制品的生产,给生物制品企业造成巨大损失,建立高效、快速、敏感度高的检测方法十分必要。建立了一种支原体巢式PCR检测方法,该方法高效、快速、灵敏,可以最大限度降低假阴性和假阳性结果的出现。该方法的建立对培养细胞、动物疫苗等生物制品企业的检测标准化管理有一定的借鉴意义。