睡美人转座子真核表达载体的构建及在猪胎儿成纤维细胞系中的表达验证

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhongqiou
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睡美人(sleeping beauty,SB)是Tcl/mariner转座子超家族的一员,为探索睡美人转座子与不同的转座酶搭配使用及与同种转座酶不同比例搭配使用时的转座效率,本实验构建了SB真核表达重组载体PT2-SV40-EGFP,通过荧光显微镜和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测进行了猪胎儿成纤维细胞系(PEFs)转染条件优化研究。研究结果表明,不同转座酶与转座子按10:1混合后细胞转染效率相似,但报告基因表达水平有较大差异,其中SB100X转座酶与转座子混合后细胞的表达水平最高;转座子PT2.
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