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分别以pEGFP-Mito和pAN4质粒为模板，扩增出MTS-EGFP和EcoRI基因片段，利用快速体外基因重组技术一重组PCR，将两者连接得到MTS—EGFP—EcoRI片段，构建克隆载体pTRE2hyg—EE，经AgeI和NotI双酶切得到MTS—EG—FP—EcoRI融合基因产物，连接克隆于真核表达质粒pEGFP—Mito后获得pMDD—Z质粒。琼脂糖凝胶电泳结果显示，MTS—EGFP和EcoRI基因片段大小分别是831bp和860bp。测序结果显示，插人pTRE2hyg—EE克隆载体中的MTS—E