【摘 要】
：
目的 建立一种快速、简易、可定量检测食源性沙门氏菌定量PCR(quantitative PCR,qPCR)方法.方法 依据沙门菌属invA基因序列设计染料法qPCR引物,建立沙门氏菌qPCR检测方法,并通过短时间增菌(short time enrichment,STE)的5管微型多管发酵计数法(mini-most probable number,mini-MPN)进行定量检测,构建mini-MPN-STE-qPCR法.使用人工污染的鸡肉混合液进行定量检测,检测结果与传统MPN计数法和平板计数法进行比较分析
【机 构】
：
丽水市质量检验检测研究院, 丽水 323000;德清县食品药品检测中心, 湖州 313200
论文部分内容阅读
目的 建立一种快速、简易、可定量检测食源性沙门氏菌定量PCR(quantitative PCR,qPCR)方法.方法 依据沙门菌属invA基因序列设计染料法qPCR引物,建立沙门氏菌qPCR检测方法,并通过短时间增菌(short time enrichment,STE)的5管微型多管发酵计数法(mini-most probable number,mini-MPN)进行定量检测,构建mini-MPN-STE-qPCR法.使用人工污染的鸡肉混合液进行定量检测,检测结果与传统MPN计数法和平板计数法进行比较分析.结果 建立的qPCR法特异性良好,方法灵敏度为50 CFU/mL,结合48孔板min-MPN和4 h短时间增菌,建立的mini-MPN-STE-qPCR法可将整个检测流程缩短至7 h.人工添加沙门氏菌的鸡肉混合液检测结果表明方法检出限为-0.347 log MPN/mL,Bland-Altman分析结果显示,此法与传统MPN计数法相关系数r2=0.994,与平板计数法相关系数r2=0.992.结论 该方法准确、简单易行、成本低、灵敏度高,可用于食品中沙门菌的快速定量检测.
其他文献
目的 建立QuEChERS结合高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定食品接触用耐高温纸制品中14种有机抗菌剂的方法.方法 样品用乙腈-水溶液(1:1,V:V)超声提取,QuEChERS方法净化,C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,以乙腈、甲醇、0.1％乙酸溶液为流动相进行梯度洗脱,二极管阵列检测器于191～400 nm检测,外标法定量.结果 14种有机抗菌剂在0.05～20.00 mg/L范围内呈良好线性关系,r≥0
目的 建立一种基于功能化石墨烯量子点与氧化石墨烯之间的荧光共振能量转移原理测定黄瓜中多菌灵、啶虫脒和毒死蜱的荧光分析方法.方法 通过一步法制备半胱氨酸和组氨酸功能化石墨烯量子点.氨基修饰的农药适配体共价连接到石墨烯量子点的石墨烯片边缘,然后引入氧化石墨烯猝灭其荧光.在农药存在下,适配体与农药分子发生特异性结合形成稳定的杂合物而不能被氧化石墨烯所吸附,造成石墨烯量子点从氧化石墨烯表面脱落且荧光恢复.结果 所制备的石墨烯量子点由2～3层石墨烯片组成,平均片径大小约为3.6 nm,360 nm紫外光激发可产生强
目的 建立三乙胺triethylamine(TEA)增强-电感耦合等离子体质谱法(inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS)准确测定食品中的痕量砷.方法 采用微波消解法进行样品前处理,以8％的三乙胺作为基体改进剂,采用碰撞池技术规避质谱干扰,锗作为内标校正非质谱干扰,用ICP-MS检测样品中的痕量砷.结果 以8％的三乙胺作为基体改进剂,可以使砷的信号增加14.1倍,显著地改善方法的精密度和准确度,方法检出限为0.42μg/kg.将该方法用于3种
目的 研制基于胶体金免疫层析法的组胺快速检测试纸条,并探究其在水产品中的应用.方法 以组胺为原料,采用琥珀酸酐对其衍生化合成半抗原;活泼酯法将半抗原与白蛋白偶联得到人工抗原;用人工抗原免疫小鼠获得单克隆抗体.采用上述原料制备出本研究试纸条,依据国家《食品快速检测方法评价技术规范》进行评价.结果 所研制试纸条对水产品中组胺检出限为高组胺鱼类400 mg/kg、一般海水鱼类及虾200 mg/kg.可特异性地检测残留组胺,而对其他与组胺结构或功能相似的生物胺无交叉反应.结论 本研究提供的试纸条操作简便,具有较高
目的 建立QuEChERS结合超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)同时快速测定水产品中20种苯并咪唑类药物及其代谢物残留量的分析方法.方法 样品经乙腈提取,用乙二胺-N-丙基甲硅烷(primary secondary amine,PSA)和中性氧化铝吸附剂净化,通过Waters ACQUITY UPLC HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱
目的 建立液相色谱-离子阱质谱法同时测定减肥类保健食品中12种非法添加化学药物的分析方法,并对56批抽检样品进行检测.方法 样品经甲醇超声提取后,经SHISEIDO CAPCELL-PAK C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)分离,以乙酸铵溶液-甲醇为流动相,梯度洗脱.采用电喷雾离子源(electrospray ionization,ESI)的正离子扫描模式对样品中非法添加的12种化合物进行定性检测.结果 该法能够同时完成对减肥类保健食品中12种非法添加化学药物的检测,方法检出限为0.1～0
目的 建立QuEChERS-超高效液相色谱-三重四极杆质谱法快速检测主要原粮与油料中101种常见农药残留的分析方法.方法 样品加入乙腈后涡旋混匀并超声提取,采用无水硫酸镁和N-丙基硅烷化硅胶(primary secondary amine,PSA)固相吸附剂净化,以乙腈-0.1％甲酸水溶液(V:V)作为流动相进行梯度洗脱,采用T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,在多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式下进行测定,外标法定量.结果 101种农
目的 建立原子荧光法快速测定莲藕中微量砷和生物吸收比.方法 按照GB 5009.11—2014《食品安全国家标准食品中总砷及无机砷的测定》中的原子荧光法对照测定,用微波辅助消解样品,用紧密内插法测定莲藕各组织和土壤中的砷.结果 方法线性关系好(r2=0.9997),检出限为0.00732 ng/mL,定量限为0.0244 ng/mL.平均回收率为99.80％～101.19％,相对标准偏差小于1％.各组织砷的生物吸收比为22.03％～79.54％,与国标法相比,通过显著性检验,方法之间没有显著性差异(P>0
目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)测定食品中非法添加2种新型他达拉非非法添加物含量的分析方法.方法 样品以甲醇为溶剂超声提取,经Atlantis?T3色谱柱(150 mm×2.1 mm,3μm)分离,以0.1％(V:V)甲酸水溶液-甲醇作为流动相,进行梯度洗脱.在电喷雾正离子模式下,采用多反应监测(multiple reaction monitorin
目的 研究樱桃多品质数据分布情况,建立樱桃多品质无损快速检测方法.方法 对樱桃样品分别测试可溶性固形物含量(soluble solid content,SSC)、可滴定酸含量(titratable acid content,TAC)、果实硬度(fruit firmness,Firm).采用统计分析方法对数据进行统计学描述,分别绘制含量分布直方图并计算直方图分布频次百分比.以樱桃样品近红外(near infrared,NIR)光谱数据为自变量、品质数据参考值为因变量建立樱桃品质无损快速定量检测模型.结果 统