【摘 要】
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目的 用体外实验探讨联合应用survivin反义寡核苷酸、基因重组融合蛋白TP40是否对膀胱移行细胞癌T24细胞具有协同抑制作用.方法 实验分为对照组、错义寡核苷酸组(MS)、反义寡
【机 构】
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复旦大学泌尿外科研究所;中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所生长因子组
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目的 用体外实验探讨联合应用survivin反义寡核苷酸、基因重组融合蛋白TP40是否对膀胱移行细胞癌T24细胞具有协同抑制作用.方法 实验分为对照组、错义寡核苷酸组(MS)、反义寡核苷酸组(AS)、TP40组和联合组(AS+TP40).RT-PCR和Westem blot法检测各组细胞survivin的表达;MTT法检测各组细胞生长情况;流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;体外成瘤实验检测各组细胞的体外锚定非依赖性生长能力.处理时间为3天.结果 所合成AS(300nM)对survivin mRNA的表达具有明显抑制作用.分别从转录水平和表达水平证明了联合组下调survivin的能力最强.MTT法显示联合组用药后生长抑制更加明显(P<0.0001),第3天细胞存活率仅12.2%,凋亡率达到96.37%.在软琼脂糖体外成瘤实验中,TP40组和AS组的体外锚定非依赖性生长的能力大大降低,联合组(TP40+AS)细胞几乎没有形成克隆.结论 采用survivin反义寡核苷酸封闭survivin的表达,可以增强TP40对膀胱移行细胞癌T24细胞的生长抑制作用,呈现协同效应.
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