【摘 要】
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目的:采用microRNA芯片技术筛选蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)凋亡中起重要作用的microRNA。方法:首先
【基金项目】
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重庆市自然科学基金资助项目(编号:cstc2011jjA10031)
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目的:采用microRNA芯片技术筛选蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)凋亡中起重要作用的microRNA。方法:首先建立SAH后VSMC凋亡模型。然后采用microRNA芯片筛选差异表达microRNA。最后采用qRT-PCR方法对筛选出来的microRNA145进行验证,并通过生物信息数据库预测其可能的靶基因。结果:通过200μmol/L氧合血红蛋白(oxyhemoglobin,OxyHb)作用24 h,成功建立SAH后VSMC凋亡模型。MTT检测显示200μmol/L OxyHb组作用24 h后吸光度(absorbance,A)值为0.197±0.131,流式细胞仪检测凋亡率为30.233±7.231,与其他组相比差异明显(P<0.05)。然后通过microRNA芯片检测,获得差异表达microRNA 22个,其中显著上调的16个,显著下调的6个。其中microRNA145差异变化最大。经qRT-PCR验证,SAH后VSMC中microRNA145异常高表达。预测结果显示,Bcl-2/腺病毒E1B19000相互作用蛋白3(Bcl-2/E1B 19 kDa-interacting protein 3,BNIP3)为其可能的靶基因。结论:microRNA145可能是调控SAH后VSMC凋亡的分子靶点。microRNA145可能通过BNIP3相关信号途径,导致了SAH后VSMC凋亡,诱发并加重了脑血管痉挛。
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