人MT1-MMP真核表达载体的构建及其在HepG2细胞中的表达及意义

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目的:克隆人膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)基因,构建真核表达载体,并检测其在人肝癌细胞HepG2中的表达。方法:采用逆转录聚合酶链式反应(RT—PCR)从人正常肝组织中扩增MT1-MMP全长cDNA,将之与pMD18~T载体连接,测序后将该片段亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1中。将构建好的pcDNA3.1/MT1-MMP真核表达载体经酶切鉴定后,采用脂质体法转染入HepG2细胞,经G418筛选,得到阳性克隆细胞株。应用RT—PCR检测转染前后该细胞株MT1-MMP mRNA表达水平。结果:①R
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