K—ras突变基因的克隆及逆转录病毒pEGZ/MCSHA载体的构建

来源 :苏州大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ywqiang
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目的克隆K-ras癌基因,测定其序列及突变类型,构建逆转录病毒表达载体.方法通过逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法从胰腺癌细胞株中克隆K-ras基因,与T-Vector载体连接后测序.构建含K-ras基因的逆转录病毒载体.结果胰腺癌细胞株Bxpc-3、Sw1990未及点突变,Patu8988 12位密码子的GGT突变为GTT,13、61位无突变.酶切证明逆转录病毒表达载体构建成功.结论 K-ras癌基因的成功克隆及逆转录病毒表达载体的构建,为胰腺癌的免疫治疗研究奠定了基础.
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