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目的建立大肠埃希氏菌喹诺酮类耐药基因的TaqMan荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法,为原料乳中耐药大肠埃希氏菌的监测提供技术方案。方法利用Chelex 100法快速获取细菌基因组DNA,对大肠埃希氏菌aac(6’)-Ib-cr和qepA基因的序列进行分析,利用Primer Express 3.0软件设计特异性引物和探针,建立单重和双重TaqMan荧光PCR方法。通过耐药基因阳性菌株和原料乳中分离的大肠埃希氏菌菌株,对方法的特异性和灵敏度进行评估。结果建