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摘要：我们在江津发现九叶青花椒根部腐烂后导致果实脱落。为此，开展了该病原的分离鉴定。结果表明，该真菌属于腐皮镰刀菌[Fusarium solani(Hart.)Sagel，引起九叶青花椒根腐。
关键词：花椒；病原菌；分离；鉴定
江津九叶青花椒为江津最为重要的经济作物，2007年全区种植面积已经达到50万亩，产量达15万吨，产值达9.2亿元。但是生产普遍存在根部腐烂，引起树体死亡。为此，本文对引起该现象的病原菌进行了分离与鉴定，以期为其防治提供依据。
1、材料与方法
1．1 材料
1．1．1 供试花椒根样 由江津区先锋镇陈永江于江津先锋夹滩社区3社花椒园采集送样。
1．1．2 供试培养基
马铃薯葡萄糖培养基(PDA)；马铃薯(去皮)200g，琼脂20g，葡萄糖20g，加水定容至1000ml。
1．2 试验方法
1．2．1 症状观察 对采集的花椒树根样本进行观察，记录病害症状。
1．2．2 病原菌的分离与纯化 组织分离：选择典型发病病斑切取5mmx5mm的小块，置于PDA平板上，每皿5片，25℃培养箱中暗培养。待病菌长出菌丝产生分生孢子后在显微镜下观察分生孢子的形态，再通过划线培养得到单孢菌落。
单孢分离：选择典型病斑的部位，放人装有少量无菌水和玻璃颗粒的灭菌三角瓶中，充分摇动，待分生孢子释放到无菌水中，制成孢悬液，用移液枪将其转到培养皿中，再倒平板后充分混匀，冷凝后置于25℃培养箱中暗培养。待病菌长出菌丝产生分生孢子后在显微镜下观察分生孢子的形态。
1．2．3 病原菌的菌落形态观察及鉴定 菌落形态观察；将单菌蓓的病原菌制片后无需染色直接在显微镜下观察菌丝形态、孢子形状，记录观察结果并拍照，按照Saccardo的真菌分类系统进行种类鉴定。
2 结果与分析
2．1 病害症状 受害植株根部变色腐烂，根皮与木质部易脱离，严重的木质部呈黑色，有的根皮上有一些白色絮状菌落，地上部分叶形变小，叶黄，枝条发育不全，有的发黄发白。
2．2 病原菌在PDA上的培养性状 25℃恒温培养条件下，病菌在PDA上形成的气生菌丝体茂盛，呈絮状，无色或淡黄色，培养皿反面无色。
2．3 病菌的分生孢子形态特征及鉴定 发现有大小型分生孢子，小型分生孢子为单胞，少数有112隔，呈卵状、梨状、椭圆状；大型分生孢子为镰刀形，1-3分隔，参照有关资料，确定为腐皮镰刀菌[Fyusarium solani(Mart.)Sate]，半知菌亚门镰刀菌属，结合症状特征，初步确定此病害为花椒根腐病。
3 讨论
本次实验通过从枯死花椒根部分离得到的病菌与朱天辉等人的研究结果相吻合，与李智敏等记载的茄形镰刀菌相一致，只是同物异名，在PDA上的培养性状与叶鹏盛等描述的形态基本一致，由此可以初步断定其为花椒根腐病。同时花椒根腐病又是一种土传病害，有其自身的复杂性，由于土壤理化性质的影响及微生物区系的庞大，往往在病原鉴定上存在较大的困难，并且F.sotani是一种腐生菌本次实验采用的是枯死标本，所以难以准确判断是因为它的入侵引起了植株的死亡还是植株死亡之后腐生上去的，对于这个问题还有待于进一步的研究。
关键词：花椒；病原菌；分离；鉴定
江津九叶青花椒为江津最为重要的经济作物，2007年全区种植面积已经达到50万亩，产量达15万吨，产值达9.2亿元。但是生产普遍存在根部腐烂，引起树体死亡。为此，本文对引起该现象的病原菌进行了分离与鉴定，以期为其防治提供依据。
1、材料与方法
1．1 材料
1．1．1 供试花椒根样 由江津区先锋镇陈永江于江津先锋夹滩社区3社花椒园采集送样。
1．1．2 供试培养基
马铃薯葡萄糖培养基(PDA)；马铃薯(去皮)200g，琼脂20g，葡萄糖20g，加水定容至1000ml。
1．2 试验方法
1．2．1 症状观察 对采集的花椒树根样本进行观察，记录病害症状。
1．2．2 病原菌的分离与纯化 组织分离：选择典型发病病斑切取5mmx5mm的小块，置于PDA平板上，每皿5片，25℃培养箱中暗培养。待病菌长出菌丝产生分生孢子后在显微镜下观察分生孢子的形态，再通过划线培养得到单孢菌落。
单孢分离：选择典型病斑的部位，放人装有少量无菌水和玻璃颗粒的灭菌三角瓶中，充分摇动，待分生孢子释放到无菌水中，制成孢悬液，用移液枪将其转到培养皿中，再倒平板后充分混匀，冷凝后置于25℃培养箱中暗培养。待病菌长出菌丝产生分生孢子后在显微镜下观察分生孢子的形态。
1．2．3 病原菌的菌落形态观察及鉴定 菌落形态观察；将单菌蓓的病原菌制片后无需染色直接在显微镜下观察菌丝形态、孢子形状，记录观察结果并拍照，按照Saccardo的真菌分类系统进行种类鉴定。
2 结果与分析
2．1 病害症状 受害植株根部变色腐烂，根皮与木质部易脱离，严重的木质部呈黑色，有的根皮上有一些白色絮状菌落，地上部分叶形变小，叶黄，枝条发育不全，有的发黄发白。
2．2 病原菌在PDA上的培养性状 25℃恒温培养条件下，病菌在PDA上形成的气生菌丝体茂盛，呈絮状，无色或淡黄色，培养皿反面无色。
2．3 病菌的分生孢子形态特征及鉴定 发现有大小型分生孢子，小型分生孢子为单胞，少数有112隔，呈卵状、梨状、椭圆状；大型分生孢子为镰刀形，1-3分隔，参照有关资料，确定为腐皮镰刀菌[Fyusarium solani(Mart.)Sate]，半知菌亚门镰刀菌属，结合症状特征，初步确定此病害为花椒根腐病。
3 讨论
本次实验通过从枯死花椒根部分离得到的病菌与朱天辉等人的研究结果相吻合，与李智敏等记载的茄形镰刀菌相一致，只是同物异名，在PDA上的培养性状与叶鹏盛等描述的形态基本一致，由此可以初步断定其为花椒根腐病。同时花椒根腐病又是一种土传病害，有其自身的复杂性，由于土壤理化性质的影响及微生物区系的庞大，往往在病原鉴定上存在较大的困难，并且F.sotani是一种腐生菌本次实验采用的是枯死标本，所以难以准确判断是因为它的入侵引起了植株的死亡还是植株死亡之后腐生上去的，对于这个问题还有待于进一步的研究。