【摘 要】
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体外点突变是研究蛋白质结构-功能关系、基因表达、载体修饰等的重要技术之一。已报道的一些体外突变方法［1～4］，一般需以单链DNA为模板，并要求对突变基因进行亚克隆和对单链DNA拯
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体外点突变是研究蛋白质结构-功能关系、基因表达、载体修饰等的重要技术之一。已报道的一些体外突变方法［1～4］，一般需以单链DNA为模板，并要求对突变基因进行亚克隆和对单链DNA拯救，技术上较复杂，多数需1周以上时间。Stratagen公司研制的Quickchange试剂盒，可以双链DNA质粒为模板，只需4步操作，在1～2 d内即可完成点突变过程［5］，但该试剂盒价格昂贵，使用次数有限。我们根据Pfu和DpnⅠ等酶的特性，自行设计了突变反应及方法，对6 kb、8 kb和14.6 kb的目的质粒分别进行了点突
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