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研究微小RNA-451(miRNA-451)下调葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)对人脑LN229胶质瘤细胞系侵袭和迁移的影响。
方法体外常规培养LN229细胞,将其分为空白对照组、无义序列组及miRNA-451组,空白对照组不进行任何处理,后2组分别转染无义序列和miRNA-451拟似物序列。转染48 h后,RT-PCR检测3组细胞miRNA-451的表达;Western blotting检测转染后细胞腺苷酸活化性蛋白激酶(AMPK)、GLUT1蛋白的表达;细胞免疫荧光染色检测转染后细胞膜蛋白GLUT1的表达;划痕实验检测细胞的迁移能力;Transwell实验检测细胞的侵袭能力。
结果与空白对照组和无义序列组相比,miRNA-451组细胞miRNA-451 mRNA的表达量明显增高,AMPK和GLUT1蛋白的表达明显减低,膜蛋白GLUT1荧光强度明显减弱,划痕修复率和穿膜细胞数(126.23±4.52、120.31±3.61 vs 48.42±2.31)明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论miRNA-451可能通过调控AMPK下调GLUT1抑制人脑胶质瘤细胞的侵袭和迁移能力。