重组枯草杆菌5-氨基酮戊酸脱水酶的纯化和性质研究

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大肠杆菌中表达的枯草杆菌5-氨基酮戊酸脱水酶(5-aminolevulinate dehydratase,ALAD),其N端含有组氨酸标签,Ni—NTA一步纯化至均一。纯化的酶比活为3.6U/mg蛋白,酶的最适pH为8.0—10.0,Km为0.95mmol~Vmax为16.7mmol/h,在55℃温浴10min,酶活保留85%,2mmol/L的K^+、Zn^2+、Mg^2+、Li^+、Fe^3+和Mn^2+提高酶活,2mmol/L的Co^2+和Ca^2+对酶活没有显著影响,2mmol/L的Cu^2+和1m
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