【摘 要】
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枯草芽孢杆菌被认为是安全的菌株,其作为底盘细胞在发酵领域具有独特的优势.然而,与使用最广泛的原核生物宿主大肠杆菌和真核生物宿主酿酒酵母相比,枯草芽孢杆菌由于缺乏基因调控元件在生物技术领域受到限制.该研究通过与bsrG/SR4的比较,成功构建了1套以I型毒素-抗毒素系统bsrE/SR5为基础的基于小RNA的新型调控系统,抑制效率达到88.8％.该系统的建立为枯草芽孢杆菌基因调控提供了新的转录后水平的调控工具.其次,我们对SR5进行了截短表达.仅保留终止子序列的SR5截短突变体也能保持较高的抑制效率(83.8
【机 构】
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工业生物技术教育部重点实验室(江南大学),江苏 无锡,214122;江南大学 生物工程学院,江苏 无锡,214122;江南大学 生物工程学院,江苏 无锡,214122;工业生物技术教育部重点实验室(江
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枯草芽孢杆菌被认为是安全的菌株,其作为底盘细胞在发酵领域具有独特的优势.然而,与使用最广泛的原核生物宿主大肠杆菌和真核生物宿主酿酒酵母相比,枯草芽孢杆菌由于缺乏基因调控元件在生物技术领域受到限制.该研究通过与bsrG/SR4的比较,成功构建了1套以I型毒素-抗毒素系统bsrE/SR5为基础的基于小RNA的新型调控系统,抑制效率达到88.8％.该系统的建立为枯草芽孢杆菌基因调控提供了新的转录后水平的调控工具.其次,我们对SR5进行了截短表达.仅保留终止子序列的SR5截短突变体也能保持较高的抑制效率(83.8％).截短后的SR5不仅能进一步减小菌体的代谢压力;同时因为片段较小(仅37 nt)能够直接通过引物添加至载体,为其应用提供了便利.bsrE/SR5转录后调控系统的构建丰富了MS-DOS[Modulation via the small RNA(sRNA)-dependent operation system]调控系统库,为枯草芽孢杆菌基因调控提供更多工具,对枯草芽孢杆菌在基础和应用研究中的发展起到了推动作用.
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