人SUMO-2 shRNA干扰表达载体构建及其对细胞增殖的影响

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摘要:目的构建干扰人SUMO一2表达的shRNA重组质粒裁体,并筛选下调人SUMO~2表达的稳定细胞株。方法设计并合成针对人SUMO一2的shRNA寡核苷酸,并将其克隆至pLKO.1质粒载体上,转染HCT116细胞后经嘌呤霉素筛选获稳定表达细胞株,并通过免疫印迹鉴定SUMO一2的表达。结果成功构建干扰人SUMO一2表达的pLKO.1质粒载体,可在HCTll6细胞中稳定表达,且能有效抑制SUMO一2蛋白质的表达。功能研究初步证明干扰SUMO一2表达可抑制细胞增殖并使处于细胞周期G,期的细胞比例上升。结论获得
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