【摘 要】
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目的:建立一种简便、实用、高效的鹿骨DNA提取方法,为动物骨类药材真伪鉴别奠定基础。方法:取净制后的梅花鹿骨、马鹿骨、牛骨、狗骨、猪骨样品,经干燥、研磨粉碎后,对脱钙时
【机 构】
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首都医科大学中医药学院; 中国中医科学院中药研究所; 哈尔滨誉衡药业股份有限公司;
【基金项目】
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中国中医科学院自主选题项目(Z02085)
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目的:建立一种简便、实用、高效的鹿骨DNA提取方法,为动物骨类药材真伪鉴别奠定基础。方法:取净制后的梅花鹿骨、马鹿骨、牛骨、狗骨、猪骨样品,经干燥、研磨粉碎后,对脱钙时间(24,48,72 h),脱钙温度(4,25,37,56,70℃)及不同提取方法(改良SDS提取法、试剂盒提取法)进行考察,分析比较不同提取方法获得的DNA质量。结果:实验证明,脱钙过程有助于骨细胞的裂解,在较宽泛的脱钙时间及脱钙温度下,均可从骨细胞中获得DNA,但提取量稍有差异。结论:骨粉经0.5 mol.L-1EDTA脱钙液4℃脱钙24 h,加入裂解液后56℃水浴1 h,即可从鹿骨(约0.1 g)中提取到高质量DNA,用于PCR扩增。
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