【摘 要】
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内质网是蛋白质合成、折叠、修饰的场所,同时作为钙储库,内质网调控钙的储存和释放,维持钙稳态平衡,对支持卵母细胞成熟和早期胚胎发育至关重要.本研究以绵羊卵丘-卵母细胞复合体(COCs)为研究对象,在COCs体外成熟(IVM)培养基中添加不同浓度的内质网钙通道抑制剂2-氨基乙基联苯基硼酸酯(0、1、10、100、1000μmol/L 2-APB),探究其对绵羊卵母细胞体外成熟质量和早期胚胎发育效果的影响.结果表明:添加10μmol/L 2-APB组卵母细胞体外成熟率和囊胚发育率均高于对照组和其他试验组(P<0
【机 构】
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赤峰学院化学与生命科学学院,内蒙古赤峰 024000
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内质网是蛋白质合成、折叠、修饰的场所,同时作为钙储库,内质网调控钙的储存和释放,维持钙稳态平衡,对支持卵母细胞成熟和早期胚胎发育至关重要.本研究以绵羊卵丘-卵母细胞复合体(COCs)为研究对象,在COCs体外成熟(IVM)培养基中添加不同浓度的内质网钙通道抑制剂2-氨基乙基联苯基硼酸酯(0、1、10、100、1000μmol/L 2-APB),探究其对绵羊卵母细胞体外成熟质量和早期胚胎发育效果的影响.结果表明:添加10μmol/L 2-APB组卵母细胞体外成熟率和囊胚发育率均高于对照组和其他试验组(P<0.05),卵裂率高于对照组(P10μmol/L)浓度增加,卵裂率和囊胚率呈剂量依赖性降低.与对照组相比,IVM培养基中添加10μmol/L 2-APB后胞内谷胱甘肽含量提高(P<0.05),胞内活性氧水平降低(P<0.05).综上,在卵母细胞体外成熟培养过程中添加10μmol/L 2-APB对提高卵母细胞体外成熟率、改善卵母细胞体外成熟质量以及提高早期胚胎发育效果具有积极作用.
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根据NCBI收录的绵羊SLC17A8(Solute Carrier Family 17 Member 8)基因序列设计特异性引物,利用PCR技术扩增兰坪乌骨绵羊SLC17A8基因外显子区,经测序后拼接序列,并对编码区序列以及翻译后蛋白序列进行蛋白结构预测.结果显示,兰坪乌骨绵羊SLC17A8基因编码区长为1770 bp,编码589个氨基酸.同源性比对显示兰坪乌骨绵羊SLC17A8氨基酸序列与普通绵羊的该基因氨基酸序列同源性达到99.66％,发现有11个突变位点,其中2个错义突变位点,SLC17A8-Exo
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