目的建立RP-HPLC法同时测定猴头菌片（猴头菌菌丝体）中5种核苷的含有量。方法该药物水提物的分析采用Zorbax SB-Aq C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;以甲醇-0.1%磷酸为流动相,梯度洗脱;体积流量0.5 m L/min;柱温26℃;检测波长260 nm。结果胞苷、腺嘌呤、尿苷、腺苷、鸟苷分别在0.007⁰.169、0.005⁰.115、0.032⁰.797、0.032⁰.792、0.004⁰.103μg范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率（n=6）分别为99.4%（RSD=2.0%）、98.3%（RSD=1.8%）、98.0%（RSD=2.8%）、101.4%（RSD=1.9%）、101.7%（RSD=1.2%）。结论不同厂家猴头菌片中5种核苷的含有量存在明显差异,应加以关注。