【摘 要】
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目的 :制备GST hPBD融合蛋白 ,探讨活化的Rac1在血管内皮细胞中的表达 .方法 :采用RT PCR方法克隆与活化Rac1相结合的hPBD基因片段 ,构建pGEX 2T/hPBD原核表达载体 ,并纯化GS
【机 构】
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沈阳军区总医院全军心血管病研究所心内科,解放军总医院老年心血管研究所
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目的 :制备GST hPBD融合蛋白 ,探讨活化的Rac1在血管内皮细胞中的表达 .方法 :采用RT PCR方法克隆与活化Rac1相结合的hPBD基因片段 ,构建pGEX 2T/hPBD原核表达载体 ,并纯化GST hPBD融合蛋白 ;应用pulldown测定血管内皮细胞中活化Rac1的蛋白表达 .结果 :基因测序证实原核表达载体pGEX 2T/hPBD序列正确 ,并在大肠杆菌中高效表达 ,纯化得到纯度约 75 %GST hPBD融合蛋白 ,其Mr 为 36 0 0 0 ;进一步分析证实血管内皮细胞可表达活化的Rac1蛋白 .结论 :成功构建了人pGEX 2T/hPBD原核表达载体 ,纯化了GST hPBD融合蛋白 ,并检测到血管内皮细胞中活化Rac1蛋白的表达
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