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目的
评价基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术快速区分携带rmpA2毒力基因的高毒力肺炎克雷伯菌的能力。
方法对浙江大学医学院附属第二医院和河南省人民医院的57株肺炎克雷伯菌，PCR扩增rmpA2毒力基因和荚膜血清型基因，多位点序列分型方法(MLST)进行分型，拉丝试验进行高黏液表型测定。MALDI-TOF MS对肺炎克雷伯菌进行鉴定并对峰图进行二维分析和算法统计，包括采用支持向量机算法(SVM)，遗传算法(GA)，监督使神经网络算法(SNN)和快速分类算法(QC)进行数据分析并建立相应模型，得到分型区分的特征峰。
结果57株肺炎克雷伯菌中有28株携带rmpA2毒力基因，MLST均为ST11型，其中拉丝试验阳性有5株；29株不携带rmpA2毒力基因，主要ST型为ST11(n＝23)，还包括ST15 (n＝3)，ST1、ST76和ST473各一株。质谱将肺炎克雷伯菌较清晰地划分成两个区域，ClinProTools软件可准确区分84.2%(48/57)的菌株。ClinProTools软件四种算法结果基本相似，SVM特异性和灵敏度最高，分别为93.23%和100%。采用ClinProTools对质谱峰进行统计显示，得到区分rmpA2基因阳性组和阴性组的2个特征峰分别为7 168.9和7 280.76，在峰强度上存在一定的差异。
结论MALDI-TOF MS快速区分携带rmpA2毒力基因的高毒力肺炎克雷伯菌方法灵敏度和特异性都在90%以上，得到两个特征峰在峰强度上存在一定差异，需进一步验证。(中华检验医学杂志，2018, 41：571-576)