【摘 要】
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目的对EV-A71的3′UTR核苷酸序列进行分析,并利用反向遗传学技术构建3′UTR置换的重组病毒,为研究3′UTR功能及其对毒力的影响奠定基础。方法提取分离病毒的RNA,对3′UTR核苷酸序列进行测定并分析。以SDLY107株全长感染性克隆为骨架,将SDLY1株的3′UTR替换到其相应部分,拯救重组病毒并鉴定。结果序列分析表明,9个EV-A71临床分离株的3′UTR核苷酸同源性为94%~100%
【机 构】
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山东大学公共卫生学院微生物检验学系 感染性疾病防控重点实验室(山东省"十三五"高校重点实验室),济南 250012,山东大学公共卫生学院微生物检验学系 感染性疾病防控重点实验室(山东省"十三五
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目的对EV-A71的3′UTR核苷酸序列进行分析,并利用反向遗传学技术构建3′UTR置换的重组病毒,为研究3′UTR功能及其对毒力的影响奠定基础。
方法提取分离病毒的RNA,对3′UTR核苷酸序列进行测定并分析。以SDLY107株全长感染性克隆为骨架,将SDLY1株的3′UTR替换到其相应部分,拯救重组病毒并鉴定。
结果序列分析表明,9个EV-A71临床分离株的3′UTR核苷酸同源性为94%~100%,个别位点突变可能影响病毒的致病性。经PCR测序鉴定重组病毒的3′UTR成功替换,转染后出现典型的致细胞病变效应,可稳定传代并具有感染性。
结论EV-A71 3′UTR可能与致病性有关。成功拯救重组EV-A71 SDLY107(1-3′UTR)株,为进一步研究3′UTR对其毒力的影响提供了基础。
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